Kit Para el Aislamiento de Espermas

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Erase

Erase es un kit que se usa para el aislamiento del esperma. Este kit elimina eficiente y eficazmente las células epiteliales de ADN de muestras que contienen mezclas de células de esperma y células epiteliales. Con el kit Erase es posible obtener un perfil autosómico masculino de muestras que se espera que produzcan un perfil de la mezcla.

Con el Kit Erase, hasta diez muestras pueden ser procesadas a mano en menos de dos horas. ERASE también puede ser automatizado usando un instrumento para manipular líquidos para pruebas de alto rendimiento.

Detalles

Como en una extracción diferencial tradicional, las células epiteliales se eliminan y las células de esperma se granulan. Después de eliminar el ADN epitelial para la prueba, el ADN de las células epiteliales restantes son destruidas, dejando intactas las células de esperma. Es posible destruir todo el ADN epitelial incluso cuando hay un número relativamente pequeño de células de esperma y una cantidad abrumadora de ADN epitelial. Este método elimina los perfiles mixtos en casi todos los casos.

Cartel de NIJ Conference 2011: extracciones diferenciales
Póster de la Conferencia NIJ 2012: Casework y Substrate Experience

Partially funded by NIJ Grant 2009-DN-BX-K039
Financiado parcialmente por NIJ Grant 2009-DN-BX-K039

Preguntas Frecuentes

¿Puedo hacer muestras simuladas para un estudio de sensibilidad utilizando semen diluido?

Sí, pero el semen debe ser fresco. Las diluciones en serie se pueden hacer utilizando semen recién recolectado (no congelado ni almacenado). Para obtener mejores resultados, el semen se debe diluir en 1X PBS y agitarlo (vórtex) durante 20 segundos para que se mezcle. Todos los pasos de pipeteado deben realizarse inmediatamente después de hacer el vórtex. Las muestras simuladas pueden hacerse de cada dilución y deben ser inmovilizadas sobre el sustrato tan pronto como sea posible después de la dilución. Tan pronto las células de esperma están secas, estas son estables y representarán fielmente una muestra forense normal. El semen que ha sido diluido no debe ser almacenado para ser reusado con Erase.

Semen puro (sin diluir) y semen diluido que han sido almacenados no crean muestras simuladas que se comportan de la misma forma que las muestras forenses cuando se utiliza el kit Erase para el aislamiento del esperma.

¿Debo comprar semen congelado para usarlo en pruebas?

No, comprar semen para hacer pruebas es problemático porque a menudo las muestras han sido sometidas a múltiples eventos de congelación y descongelación y además contienen preservantes.

¿Hay muestras de casos en lo que no debería utilizar el kit Erase?

Aunque ERASE supera frecuentemente las extracciones diferenciales estándares en la mayoría de evidencias de asalto sexual y muestras post-coitales, el uso de ERASE no se recomienda como el primer método de pruebas en cualquier caso donde la muestra de evidencia fue recogida (recuperada) de un cuerpo y / o el artículo en agua (lago, río, etc.) o de restos severamente descompuestos. PTC trabaja con una clínica de infertilidad (en conjunto con sus pacientes) que proporciona una fuente de hisopos postcoitales. Esos hisopos están disponibles con fines de validación si cree que podrían ser útiles en sus estudios. Si su laboratorio no cuenta con medios fácilmente disponibles para producir hisopos falsos para un estudio de sensibilidad o un estudio de sustrato, comuníquese con PTC e intentaremos satisfacer sus necesidades.

¿Hay algunos sustratos en los cuales se ha descubierto que el kit ERASE no funciona?

Los estudios de sustrato que se han completado han demostrado que ERASE ha funcionado exitosamente en los siguientes artículos: preservativos (condones), tampones, toallas sanitarias, tela de mezclilla (denim), telas de algodón negro/azul, nylon blanco y sangre. No se conocen sustratos que presentan un problema cuando se utilizan con ERASE.

¿Cuánto tiempo se lleva en completar una extracción diferencial con Erase?

Para completar una extracción diferencial con ERASE, se lleva aproximadamente 2 horas de tiempo actual y unos 10 minutos de preparación. Luego, la muestra está lista para la purificación de ADN.

¿Tiene que ser purificada mi muestra de ADN después de ERASE?

Sí. Actualmente ERASE ha demostrado ser compatible con los métodos de purificación de ADN EZ1/Symphony, Maxwell y PCIA. Aunque, se espera que otros métodos de purificación funcionen pero estos no han sido probados.

¿Puede Erase ser automatizado en mi manipulador de líquidos?

Erase puede ser automatizado en cualquier manipulador de líquidos. Por favor, póngase en contacto con PTC Laboratorios para asistencia con la programación.

¿Ha sido ERASE probado con muestras viejas?

Sí. Erase ha sido probado con éxito en muestras post-coitales que tienen 15 años y que han sido almacenadas a temperatura ambiente.

¿Funciona ERASE cuando las muestras vaginales no se recogen sino hasta muchas horas o días después del asalto sexual?

Sí. Erase es muy útil en estas situaciones. Incluso cuando hay muy pocas células de esperma en comparación con la cantidad de células epiteliales, por lo general, es posible obtener un perfil de ADN del esperma de la fracción de espermas de una extracción diferencial ERASE.

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